細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

產品介紹

HCT116+GFP細胞培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持HCT116+GFP細胞優良的生長狀態。

本產品中已包含HCT116+GFP細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于HCT116+GFP細胞的培養。

產品主要成分

McCoy’s 5A 基礎培養基                                445 mL

特級胎牛血清                                             50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

小鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai endomeial aibody (EMAb) ELISA Kit 大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)試劑盒

HumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit 樣轉錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCP試劑盒人抗環胍肽抗體(CCP)試劑盒規格：96T/48T

植物活性線粒體分離試劑盒10次

Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit人α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒規格：96T/48T

大鼠脂肪酸合酶(FASN)試劑盒 ，英文名： FASN ELISA Kit

Mouse soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)試劑盒

MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT人結合珠蛋白/觸珠蛋白

比色法定量試劑盒20次

ELISAKitbFGF-6大鼠堿性成纖維細胞生長因子6

小鼠CD34(mouse CD34)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠補體C3a(mouse C3a)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠補體C5a(mouse C5a)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

跨膜蛋白酶絲1抗體

鋅指蛋白547抗體

CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CD72分子(CD72)重組蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)

AZGP1重組人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 蛋白 Protein

DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽)

CST3 Protein Rat 重組大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白

HCT116+GFP 細胞專用培養基白介素5(IL5)重組蛋白 Recombinant Interleukin 5 (IL5)

CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白

ROBO4重組小鼠 ROBO4 蛋白 Protein

CD4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD4 蛋白

GABARAPL2重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 Protein