細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進(jìn)一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠酸激酶(PK)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 大鼠輕化1(HYD)試劑盒

HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-B試劑盒人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次

HumanSS-B/LaAibody,ELISAKit人抗SS-B/La抗體試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)試劑盒 ，英文名： IGFBP6 ELISA Kit

Mouse endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒

MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanCyclin-D3ELISAKit人細(xì)胞周期素D3

細(xì)胞AURORA-A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitON大鼠骨粘連蛋白

脫脂奶粉   100g

Skimmilk   500g

超氧化物歧化酶   30KU

SOD   3KU

棉鈴蟲紫外波長(zhǎng)敏感的視蛋白抗體

脂滴包被蛋白A+B抗體

ACVRL1重組小鼠 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase 0.5mgCNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase) C型尿肽抗原

LSAMP重組人 LSAMP 蛋白  Protein

ANXA5 Protein Human 重組人 ANXA5 / Annexin Ⅴ / Anne屬

L15 培養(yǎng)基Flag-Tag (CT 1mgFlag-Tag (CT) Flag Tag標(biāo)簽多肽

FGFBP3 Protein Human 重組人 FGFBP3 蛋白

EFNB3重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 Protein

FETUB Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白

CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein