細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

產品介紹

小鼠角膜上皮細胞永生化細胞培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持小鼠角膜上皮細胞永生化細胞優良的生長狀態。

本產品中已包含小鼠角膜上皮細胞永生化細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠角膜上皮細胞永生化細胞的培養。

上皮細胞培養體系          500 ml

產品主要成分

上皮細胞基礎培養基                              480 ml

上皮細胞培養添加劑                              5 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ornithine carbamoyl ansferase (OCT) ELISA Kit 人鳥氨基甲酰轉移酶(OCT)試劑盒

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真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒20次

MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒規格：96T/48T

大鼠纖調蛋白(FMOD)試劑盒 ，英文名： FMOD ELISA Kit

Mouse chorionic gonadoopin beta (-CG beta) ELISA Kit 小鼠絨毛膜β(β-CG)試劑盒

Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 小鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHTLV-I(Huma-lymphoopicvirusI)ELISAKit人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒

細胞HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitBTA大鼠膀胱腫瘤抗原

小鼠血清總補體(CH50)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠胰島素(INS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

微管相關蛋白Tau-4單克隆抗體

EMID1蛋白抗體

LMAN2L重組人 LMAN2L 蛋白 (Fc 標簽) Protein

SYK (Spleen tyrosine kinase 0.5mgSYK (Spleen tyrosine kinase) 非受體型酪激酶(抗原)

IL1RAP重組人 IL-1RAcP / IL-1R3 蛋白 Protein

DPP4 Protein Human 重組人 DPP4 / CD26 蛋白

TNF Protein Human 重組人 TNF-alpha / TNFA 蛋白

小鼠角膜上皮細胞永生化細胞專用培養基膠質細胞系來源神經營養因子受體α1(GFRα1)重組蛋白 Recombinant Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor Receptor Alpha 1 (GFRa1)

FAS Protein Human 重組人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白

SELPLG重組小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 Protein

TNF Protein Canine 重組狗 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A 蛋白

DBI重組人 DBI / ACBD1 蛋白 Protein