細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

豬原代腎小球系膜細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持豬原代腎小球系膜細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含豬原代腎小球系膜細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于豬原代腎小球系膜細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠0酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 大鼠結締組織生長因子(CTGF)試劑盒

Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit 人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)pcr檢測試劑盒分裝

HumanAdenovirusAigen,ADV-Ag試劑盒人腺病毒抗原(ADV-Ag)試劑盒規(guī)格：96T/48T

直接細胞克隆兩步法逆轉錄PCR試劑盒100次

Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISAKit小鼠小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠載脂蛋白C1(APOC1)試劑盒 ，英文名： APOC1 ELISA Kit

Mouse phosphotylinosital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)試劑盒

MouseLeptin,LEPELISAkit 小鼠瘦素(LEP)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHumanfibromodulin,FMODELISAKit人纖調蛋白

細胞/組織高質化高爾基體分離試劑盒10次

ELISAKitMMP-5大鼠基質金屬蛋白酶5

小鼠膠原酶Ⅲ(CollagenaseⅢ)試劑盒

小鼠降鈣素原(PCT)試劑盒

小鼠降鈣素受體(C)試劑盒

小鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)試劑盒

酪蛋白激酶1結合蛋白抗體

鋅指蛋白660抗體

SERPINA6重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 Protein

ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉換酶(抗原)

FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & G

豬原代腎小球系膜細胞專用培養(yǎng)基ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉換酶(抗原)

DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標簽)

SERPINA6重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 Protein

LAMP1 Protein Rat 重組大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 標簽)

FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標簽) Protein